北美株 PRRSV + 内标IPC2(防假阴性)荧光定量pcr试
Source:adminAuthor:admin Addtime:2025/11/05 Click:
这是一款专为精液样本中猪繁殖与呼吸综合症病毒北美株(PRRSV-NA) 检测而设计的高可靠性分子诊断试剂盒。它通过在传统荧光PCR技术中引入内部阳性对照2(IPC2),有效监控整个检测过程,从根本上杜绝假阴性结果,为种公猪站和人工授精的生物安全提供最高级别的保障。
荧光探针法实时荧光定量PCR:试剂盒中的引物和荧光探针会特异性结合PRRSV-NA病毒的特定基因序列(如ORF5或ORF7区)。在PCR扩增过程中,探针被水解,释放出荧光信号,通过仪器实时监测荧光强度的变化,从而对病毒核酸进行定性和定量分析。
内标IPC2的作用:在样本核酸提取之前,就将一段已知、非感染性的RNA或DNA序列(IPC2)添加到样本裂解液中。它随后与样本一同经历核酸提取、纯化和PCR扩增的全过程。
2. 为何需要IPC2—— 解决“假阴性”难题
精液成分复杂,含有多种可能抑制PCR反应的物质(如酶、离子、血红蛋白等)。如果没有内标,可能出现以下风险:
情况:样本中实际含有PRRSV-NA,但精液中的抑制物破坏了PCR反应。
结果:病毒和目标IPC2均无法被扩增,仪器在病毒通道和IPC2通道均检测不到信号。
结论:系统会判定本次检测无效,而非简单的“阴性”。操作人员必须重新进行检测,或对样本进行稀释等去抑制处理,从而避免了发出一份危险的假阴性报告。