羟基磷灰石CHT层析机理
Source:羧基磁珠Author:admin Addtime:2018/12/26 Click:
羟基磷灰石包括两个结合位点：Ca2+ 和 PO43-。这些结合位点按照其自有的晶体结构分布。PO43－离子与带正电的蛋白质以离子键结合，具有阳离子交换特性；其中的 Ca2＋离子与带负电蛋白质的自由羧基簇以金属螯合方式结合。
阳离子交换作用：
阳离子交换作用：当蛋白带负电荷时候，可以与 PO43-结合，而与Ca2+是相互排斥，这种作用主要是阳离子交换作用。这种阳离子交换作用会受到洗脱缓冲液中的中性盐浓度（如;NaCl）或者平衡液中磷酸盐浓度的影响。这种作用随着 pH 的增高也会相应减弱。因此，增加盐、磷酸盐的浓度或增高 pH，都会减弱目的蛋白与 PO43-之间的相互作用。
钙金属螯合作用：Ca2+ 可以与蛋白或其他分子（如;核酸）表面的羧基簇或磷酸基团发生金属螯合作用，而同时与 PO43-相排斥。这种结合方式作用力是一般离子交换的 15-60 倍。所以这种结合方式受离子的影响比较小，对 NaCl 不敏感。而且这种作用力随着离子强度会增加钙金属螯合力，原因是由于离子强度的增加屏蔽了分子表面功能基团与 PO3-之间的相互排斥作用。这种结合方式可以通过磷酸钠进行洗脱。
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