规格： 50 T/ 100 T
 
 
保存： 室温(15 ℃ -25 ℃ ) 干燥保存， 复检期 12 个月， 2 ℃ -8 ℃ 保存时间更长 。
 

试剂盒内容：	50 T	100 T
RNase A	1ml	1ml × 2
蛋白酶 K	1ml	1ml × 2
红细胞裂解液	120 ml	120 ml× 2
溶液 A	15 ml	25 ml
溶液 B	15 ml	30 ml
漂洗液	15 ml	15 ml× 2
洗脱液	10 ml	20 ml
吸附柱	50   个	100  个
收集管	50   个	100  个
说明书	1 份	1 份

 

产品简介:

 
 
本试剂盒采用可以特异性结合 DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统， 提取全血基因组 DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料， 能够高效、 专一吸附 DNA， 可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。 提取的基因组 DNA 片段大， 纯度高， 质量稳定可靠。 使用本试剂

盒提取的基因组 DNA 可用于各种常规操作， 包括酶切、 PCR 、 文库构建、Southern 杂交等实验。
 

操作步骤：

 
 
使用前请先在漂洗液和溶液 B 中加入无水乙醇 ，加 入体积请参照瓶体上的标签。 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
 
1 、 样 品 的 处 理 ( 本 产 品 适 用 于 处 理 新 鲜 的 或 已 经 添 加 抗 凝 剂 的0. lml- 1 ml 血液样品)：
 
a 、 在血液样品中加入 2- 3 倍体积的红细胞裂解液， 充分颠倒混匀， 12000 rpm 离心 1min， 小心吸去上清， 沉淀应为白色或淡红色， 如果裂解不彻底， 可重复以上述步骤一次。 向沉淀中加 200 ul 溶液 A， 振荡至彻底混匀。
 
b、 如果处理的血样为禽类、 鸟类、 两栖类或更低级生物的血液， 其红细胞为有核细胞，因此处理量为 5- 20 u 1 ，不需要再用红细胞裂解液处理，直接加 200 ul 溶液 A， 振荡至彻底混匀。
 
2 、 向悬浮液中加入 20 ul (10 mg/ ml) 的 RNase A， 充分颠倒混匀， 室温放置 10 min。
 
3 、 加入 20 ul ( 10 mg /ml ) 的蛋白酶 K， 充分颠倒混匀， 65 ℃ 水浴消化 30 - 60 min， 消化期间可颠倒离心管混匀数次， 直至样品消化完全为止。
 
4 、 加入 2 倍体积溶液 B( 使用前请先检查是否己加入无水乙醇)， 充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，不影响 DNA 的提取，可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中， 室温放置 2min。
 
5 、 12000 rpm 离心 2min， 弃废液， 将吸附柱放入收集管中。

6 、 向吸附柱中加入 700 ul 漂洗液( 使用前请先检查是否已加入无水乙醇)， 12000 rpm 离心 1min， 弃废液， 将吸附柱放入收集管中。
 
7 、向吸附柱中加入 500 ul 漂洗液， 12000 rpm 离心 1min， 弃废液， 将吸附柱放入收集管中。
 
8 、 12000 rpm 离心 2min， 将吸附柱敞口置于室温或 50 ℃ 温箱放置数分钟， 目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、 PCR 等。
 
9 、将 吸附柱放入一个干净的离心管中 ，向 吸附膜中央悬空滴加 50 - 200 ul 经 65 ℃ 水浴预热的洗脱液， 室温放置 5min， 12000 rpm 离心 1min。
 
10 、 离心所得洗脱液再加入吸附柱中， 12000 rpm 离心 2min， 即可得到高质量的基因组 DNA。
 

注意事项:

 
 
1 、 本试剂盒置于室温( 15 -25 ℃ ) 干燥条件下可保存 12 个月， 更长时间的保存可置于 2 -8 ℃ 。
 
2 、常用的血液抗凝剂有 EDTA、ACD 和肝素等， 需注意的是， 如欲制备大分子量血液基因组 DNA ， 可优先考虑使用 ACD 抗凝。 一般不使用肝素抗凝， 因为用肝素抗凝的血液提取的基因组 DNA 进行 PCR 扩增时， 有 PCR 扩增抑制现象。
 
3 、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量也下
 
降。
 
 
4 、 如果试剂盒中的溶液出现沉淀， 可在 65 ℃ 水浴中重新溶解后再使用， 不影响效果。